透析袋型号(透析袋型号的意思解释)

透析袋型号mwco100kda

透析袋有很多种，一般以分子量大小区分，有100，300，500，1000，2000---一直到35万，100万，有干燥的，一卷一卷的，不同的宽度，和长度，价格也不一样，具体使用方法是一样的，一般要用到专业透析夹，事半功倍。最简单的方法就是把干燥的透析袋在蒸馏水里面煮5-10分钟后，用蒸馏水清洗赶紧，就可直接用，保存的话，一般都是直接放在蒸馏水中，4度保存即可。另有一种即用型的透析袋，清洗干净后直接用，分子量1000到10万吧，但是价格较贵，一般都是1M的小包装，西安有家公司透析袋种类很全，具体是那家，好像是罗森伯吧，你网上搜下，应该有信息，货全，价格很不错。希望能帮到你。

透析袋宽度怎么选择

3000或8000是指透析袋的分子截留量，3000是指分子量3000以上的从透析袋中保留，3000以下的可以扩散到透析袋外面的溶液中，8000是指分子量8000以上的从透析袋中保留，8000以下的可以扩散到透析袋外面的溶液中，杂蛋白的存在与透析的影响不大，主要考虑目的蛋白的分子量，要根据目的蛋白的分子量选择透析袋的型号

透析袋种类

荣瑞芬，教授，博士，主要从事农产品贮藏加工与营养品质保持基础科学及技术开发方面的研究。

核桃是世界四大干果之一，营养与保健价值极高。近年来植物多糖的生物活性备受关注，研究也越来越深入，但有关核桃仁多糖的研究极少。核桃各组织部位都含多糖，为更好地开发核桃多糖营养健康作用，特别是核桃粕多糖提取利用，北京联合大学生物化学工程学院和河北省(邢台)核桃产业技术研究院的荣瑞芬，齐琳，苏晨，刘洋，王兴国等人对近年来国内外核桃多糖的提取、分离纯化、测定、分子结构特性及生物活性研究文献进行了全面、深入的梳理与分析，获得了一系列对核桃多糖研究有意义的数据信息:超声和微波辅助热水提取工艺效果好，高于85℃和150min的提取工艺、体积分数超过90%的乙醇沉淀多糖得率高；Sevag法脱蛋白，再分别用不同截留分子质量透析与DEAE-Sepharose、Sephadex纯化可获得分子质量在7015～133021u的不同多糖；不同组织部位核桃多糖都含有葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、***糖和甘露糖，表明核桃多糖以酸性杂多糖为主，并呈现抗癌、抗氧化、降血糖、抑菌、预防老年痴呆等多种生物活性。核桃多糖研究对核桃产业链的提质增效具有重要的实践意义。

核桃，为胡桃科植物果实，与扁桃仁、腰果及榛子并称“四大干果”[1]。核桃是我国重要的特色优势农产品，截至2018年底，我国核桃种植面积为816.57万ha，核桃年产量382万t，位居世界第一。核桃仁中脂肪、蛋白质、碳水化合物的含量分别约为65%、15%、14%，并含有多种维生素及矿物质，营养素全面且均衡。此外，核桃还富含多种功能成分，如胡桃醌、多酚、黄酮和多糖等，很早就被古人作为*材入*，可见，核桃是具有极高营养和保健作用的健康食材[2-5]。

近年来的研究发现许多植物多糖具有抗肿瘤、抗菌、增强免疫功能、降血糖、降血脂、抗氧化等多种保健作用[6-8]，多糖相关研究已成为近年来的研究热点，大豆多糖[9]、枸杞多糖[10]、香菇多糖等[11-12] 已开发应用。核桃果实不同组织都含有多糖，如核桃青皮、核桃分心木(隔膜)、核桃壳、核桃楸仁多糖均有研究报道[13-27]。目前，研究内容主要集中在多糖的提取和生物活性方面，对多糖组成和结构研究还较少。核桃仁为核桃可食部分，其所含多糖不需提取即可被吸收利用，而当前对核桃仁多糖的研究极少。研究核桃仁多糖含量、结构组成及生物活性对深入了解核桃营养健康作用具有更深刻的现实意义。核桃仁中总糖质量分数约占14%，榨油之后的核桃粕，总糖可达40%，多糖浓度也随之增加，以核桃粕为原料研究核桃仁多糖对核桃粕高值化利用也具有重要的实践意义，因此核桃仁和核桃粕多糖的研究亟待开展。

本文对国内外核桃多糖的提取、分离纯化、含量测定、结构测定及生物活性的研究进展进行了全面的综述，以期为开展核桃多糖深入研究及开发利用提供参考和依据。

目前，核桃多糖提取常用方法是热水浸提法，为提高多糖提取得率，前人利用酶解法、超声辅助法和微波法辅助法对多糖进行了提取，核桃不同组织以及不同提取方法与工艺对核桃多糖提取得率影响不同，核桃多糖提取工艺与结果分析比较见表1。

由表1可知，前人对核桃青皮多糖研究较多，热水浸提结合其他不同辅助方法多糖提取得率不同。超声辅助法提取多糖得率最高，平均为10.24%，其次是微波辅助提取得率为8.21%，单纯热水浸提提取得率为3.13%，酶法辅助提取得率为1.55%。可见超声辅助和微波辅助提取多糖是非常有效的提取方法，同时还能大大减少提取时间，降低提取温度，是一种高效的提取方法，其中超声辅助又好于微波辅助提取，具有很好的应用前景。

表1不同工艺提取核桃多糖的研究结果

—为未见说明。

提取工艺条件中，纯热水浸提中提取温度和提取时间对多糖提取得率影响较大，提取温度在85℃以上，同时提取时间在150min以上时，提取得率较高。料液比在1∶20g·mL-1以上时提取效果较好。

由表1数据计算各组织部位多糖提取得率，青皮在3.13%～10.24%，核桃壳在2.2%～3.1%，核桃分心木多糖提取率最高，为17.42%。核桃楸仁是山核桃，核桃楸仁和青皮多糖提取得率分别在6%和12%以上，较普通核桃相应组织部位的多糖含量高。核桃青皮、核桃壳、核桃分心木含油脂、蛋白质极少，多糖提取影时响因素较少，但表1显示，核桃青皮多糖得率相差较大，核桃多糖提取工艺对多糖得率影响较大，多糖提取工艺需要进一步优化。

2.1 去除蛋白质

多糖提取液中常混有蛋白质，使用Sevag法、三氯乙酸(trichloroaceticacid，TCA)法、蛋白酶酶解法可以使蛋白质沉淀从而去除蛋白质，不同处理方法脱除核桃多糖中蛋白质的研究结果见表2。

从表2可知，体积分数为5%～10%的三氯乙酸脱蛋白的效率较Sevag法高，但多糖的损失率也较高，使用的强酸试剂可能会降解多糖，影响多糖结构以及活性。Sevag法需多次脱除操作，也能脱除80%以上的蛋白质，多糖损失率低，因使用有机溶剂进行实验，反应条件温和，不会对多糖结构造成影响，因此，采用Sevag法脱蛋白更好，脱除次数在5～7次较为适宜。酶法脱除蛋白质具有温和、无毒、蛋白质残留少等特点，但在核桃中的研究应用相对不多。

表2Sevag法及TCA法去蛋白质纯化多糖

—为未见说明。

2.2 透析法去除小分子物质

透析法是将多糖溶液放入透析袋中，在自来水、蒸馏水中透析，从而将小分子物质如小分子低聚糖、盐离子除去而使大分子物质截留在溶液中的分离方法。总结的核桃多糖在分离纯化时应用透析的研究数据见表3，透析袋分别选用了8000、14000u和8000～14000u的截留范围，去除小分子杂物，这种透析有可能导致分子质量小于8000u的多糖丢失。因此，透析袋型号的选用应考虑所提粗糖中多糖分子质量的分布，可分别选用不同截留分子质量透析袋透析，以减少型号选用不当造成多糖的损失[28]。

表3透析法分离纯化核桃多糖

—为未见说明。

2.3 沉淀法分离纯化

沉淀分离是根据多糖分子质量大小的不同及溶解能力的不同在有机溶剂中沉淀而得到多糖的分离方法，包括有机溶剂沉淀法如乙醇、丙酮，盐沉淀法如多糖与铜盐、季铵盐，形成不溶物而获得多糖，研究中常选择乙醇对核桃多糖进行沉淀。不同分子质量的多糖在不同浓度乙醇中的溶解能力存在差异，因此，可选用不同浓度乙醇分步沉淀分离不同性质的多糖，王文泽[18]利用体积分数为10%～100%(10%为梯度)的乙醇对核桃楸青衣多糖进行了分级沉淀和分步沉淀的研究，综合考虑最终确定沉淀方法为无水乙醇一次沉淀法。多糖醇沉所用乙醇浓度也不尽相同，一般选用70%～90%[14,20,28]。

2.4 柱层析法分离纯化

核桃多糖分离纯化时常使用的柱层析方法有纤维素柱层析法、离子交换柱层析法、凝胶柱层析法，进行不同分子质量多糖的分离和去杂，不同柱层析法对不同核桃组织多糖分离纯化的效果见表4。

表4柱层析法分离纯化核桃多糖

前人采用了DEAE-纤维素25-52、SephadexG75-100以及大孔树脂柱层析法分离核桃分心木、核桃青皮和核桃楸青皮多糖，其中核桃分心木分离得到分子质量为0.7015×104、1.3057×104 u的两种多糖，核桃楸青皮分离出4种分子质量分布在1.27×104～22.79×104 u的多糖，核桃青皮仅做了Sephadex柱层析分离提高纯度达90%左右，未进行分子质量大小研究，而青皮中多糖含量相对较高，应对分子质量进行研究。由表4可知核桃楸青皮多糖组分多、分子质量较大。

经初步提取后的多糖中通常有脂肪、蛋白质、色素等杂质存在[33]，常采用Sevag法或TCA法去除蛋白质，透析或超滤去除小分子物质，用多种柱层析纯化方法对多糖进行进一步纯化。离子交换柱色谱法是纯化蛋白质、多糖等生物大分子的有效方法。核桃多糖有多种，分子质量大小不同，现有研究还不够深入，采用柱层析分离时，要认真分析、设计科学适宜的柱层析分离方法，才能减少分离纯化时多糖的损失。

植物多糖提取时常选用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法对多糖含量进行检测，苯酚硫酸法的稳定性和重复性要优于蒽酮硫酸法。表5为两种不同方法检测核桃不同组织多糖含量的结果对比。

由表5可知，核桃中多糖含量因品种、组织部位的不同具有一定的差异，核桃壳中含量最高，为22.22%，青皮7.48%以上，分心木约5.15%，核桃仁5.33%。两种测定方法中苯酚-硫酸法测定值较蒽酮-硫酸法所测值高出约5个数值，相差较大[36]，但也有文献报道蒽酮-硫酸法测定值较苯酚-硫酸法高[14]；核桃青皮干制法影响多糖含量，自然晒干的高于烘箱烘干的含量，高出6个数值，表明多糖对高温不稳定。表5中核桃不同组织材料多糖含量与表1中相应的组织材料多糖得率也不一致，分析原因，其一可能与多糖提取纯度有关，水溶醇沉方法提取可能使多种水溶的成分残留在粗多糖中，如蛋白质、多酚类成分，而这两种成分在核桃仁中含量都很丰富，导致提取多糖纯度不高；其二与粗多糖本身是一个多种糖分组成的混合物有关，不同提取方法、不同组织部位材料其成分组成会有差异，导致测定值不同；从前人研究结果中可知多糖提取包含多个处理，对多糖含量与稳定性的影响较大，是影响多糖纯度和含量准确的关键环节，因此，在多糖研究中一定要对提取环节进行精心设计和不同提取方法比较优化，以保证多糖研究数据的可靠性。

表5苯酚-硫酸法与蒽酮-硫酸法测定核桃多糖含量

目前，关于核桃多糖结构的研究多集中在一级结构的研究，常用红外光谱、核磁共振、质谱、气相色谱等方法进行分析研究，结构的分析有助于生物活性的研究。

4.1 多糖官能团特征的分析

核桃多糖红外光谱的扫描范围为400～4000cm-1，通过对多糖官能团的测定，可以分析不同组织部位的核桃多糖的基团和构型，有助于多糖结构分析，官能团特征信息见表6。

不同组织部位核桃多糖400～4000cm-1红外光谱扫描显示了多糖的基本官能团结构特征，都有糖醛酸官能团，表明核桃多糖为酸性多糖。核桃青皮和核桃内种皮多糖中有β构型，分心木多糖中有α-异头构型，其他团能团特征信息还需要进一步深入研究。

表6红外光谱法分析多糖官能团特征

4.2 多糖分子质量的分析

前人通过凝胶渗透色谱分离山核桃、核桃青皮和分心木多糖分子质量信息见表7。多糖分子质量的大小影响着它的生物活性，如水溶性葡聚糖的分子质量需要大于9×104 u才可能形成3股螺旋结构，从而可能具有一定的免疫活性，当分子质量为10×104～20×104 u时其活性最强[14]。从表7数据可知，山核桃青衣多糖的分子质量为13.3021×104 u，可能存在一定的活性。

4.3 单糖组成的分析

核桃多糖的单糖组成见表8。

不同组织部位的核桃多糖的单糖组成差异较小，基本都含有葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、***糖和甘露糖，单糖组成在7个以上，各单糖组分占

表7高效凝胶渗透色谱法及凝胶渗透色谱法分析多糖分子质量

表8不同组织部位核桃多糖的单糖组成及比例

—为未见说明。

比不同。核桃分心木中以鼠李糖、葡萄糖较多，核桃青皮多糖中以葡萄糖和半乳糖的比例较高，核桃壳多糖中以D-***糖最多，其次是葡萄糖和半乳糖的比例较高。综合表6和表8可推测核桃多糖为酸性杂多糖，不同组织部位多糖单糖组成很接近。

由于多糖结构的复杂性，已有研究仅进行了核桃多糖结构单糖组成、糖苷键型、分子质量的初步研究，对多糖的高级结构还未涉及。

众多学者对核桃不同组织部位的水提多糖进行了生物活性研究，核桃青皮、核桃壳、核桃分心木和核桃内种皮多糖均具有多种生物活性。

5.1 抗肿瘤

分离纯化的核桃分心木多糖具有抗肿瘤功效[45]。研究表明：核桃楸果水提物及分离出分子质量为2.279×105 u的均一多糖对S180、H22、LWS造模小鼠肿瘤有抑制和抗癌活性[30，46]。

5.2 降血糖

核桃分心木水提液对糖尿病小鼠血糖和胰腺结构影响的研究表明核桃多糖可以降低患有糖尿病动物的血糖值[47]。核桃青皮多糖能够降低高果糖饮食小鼠的血糖浓度，对胰岛素抵抗具有调节作用[48]。分离纯化的核桃分心木多糖具有一定的降血糖作用[49]。

5.3 抗氧化

采用水杨酸法和邻苯三酚自氧化法测定核桃青皮多糖清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的能力，发现核桃青皮多糖的清除能力弱于维生素C[23]；核桃青皮多糖具有总抗氧化能力，其清除羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的能力弱于维生素C[26]。经过蒸汽热烫方法处理后的光核桃，其多糖含量及抗氧化活力得到了明显的提高[50]；核桃分心木多糖具有清除羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和还原Fe3+的能力[51]；核桃青皮果胶具有清除DPPH自由基的能力[52]。

5.4 抑菌

分离纯化的核桃仁种皮多糖对金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌有抑制效果[39]；分离纯化的核桃仁种皮多糖抑制酸奶霉菌的效果随其质量浓度的增加而增强，抑制霉菌的最佳质量浓度为500mg/L[53]；分离纯化的核桃分心木多糖具有显著的抗菌活性[54]。

5.5 预防阿尔茨海默病

分别用水、乙醇和丙酮等3种溶剂对核桃仁进行提取，研究3种提取物对阿尔茨海默病模型大鼠IL-1、IL-6含量的影响，结果表明3种提取物均具有预防模型大鼠患阿尔茨海默病的作用[55]。

目前，对核桃青皮、核桃壳、核桃分心木、核桃内种皮及核桃楸多糖提取工艺已经进行了广泛的研究，对核桃多糖结构组成及生物活性方面进行了初步研究，为核桃多糖进一步深入研究及核桃仁多糖研究奠定了一定的基础，但研究中还存在一些问题需进一步改善提高。

6.1 核桃多糖研究的思考与建议

1)提取方法的改进与优化。核桃青皮、壳、分心木及核桃内种皮和核桃仁中都含有丰富的多酚和黄酮类成分，提取过程中极易氧化褐变，影响多糖提取物色泽和含量准确性的测定，可考虑先进行乙醇脱酚处理，再提取多糖，降低提取中的杂物，提高多糖纯度。

2)多糖的分离纯化。核桃多糖种类较多，分子质量主要集中在7015～13057u，可据此选择或设计适宜的分离纯化工艺，尽可能多的保留提取的多糖。

3)多糖含量的测定方法。目前，提取多糖的测定均是采用苯酚-硫酸法或蒽酮-硫酸法，但两种方法所测多糖值相差较大，这种差异是两种方法的系统误差所致，因此，需对两种方法进行评价，并进行相关性分析。

4)多糖结构与生物活性研究。鉴于多糖结构研究的复杂性和烦琐性，及前人用多糖提取物研究其生物活性也获得相应的结果，建议采用较高纯度的多糖先进行多糖活性研究，在活性研究的基础上开展结构特性研究。

6.2 核桃仁多糖研究展望

核桃多糖研究中的研究材料多是不可食用的副产物，而对可食用的桃核桃仁多糖研究极少。核桃仁中的多糖不需要提取，直接食入体内而发挥作用，因此，开展核桃仁多糖研究对提升核桃营养健康价值具有很重要的现实意义。核桃油是核桃仁之精华，其加工副产物核桃粕目前尚未得到很好的利用，核桃粕因核桃油的分出，其所含其他成分得到浓缩，碳水化合物含量约占40%，多糖浓度也相应提高，这有利于开展多糖研究。因此开展核桃粕多糖提取、结构组成和生物活性研究对充分利用核桃资源和更好的发挥核桃的营养保健作用有着重要的理论和实践意义。核桃粕主要成分是蛋白质，其次是碳水化合物和残留少量的核桃油，再其次是核桃酚类化合物，极富营养价值，目前利用核桃粕提取蛋白制备核桃多肽研究较多，如能在提取蛋白的基础上，在前人核桃多糖研究基础上高效开展核桃多糖研究，不仅阐明核桃仁多糖含量、组成结构、生物活性，而且能够充分实现核桃粕高值化利用，促进核桃精深加工，延长核桃深加工产业链，提高产业链效益，对实现核桃产业链的提质增效具有重要的实践意义。

参考文献：（略）

引用格式：荣瑞芬，齐琳，苏晨，等.核桃多糖研究进展[J].食品科学技术学报，2021,39(3):11-21.

RONGRuifen,QILin,SUChen,etal.Researchprogressonwalnutpolysaccharide[J].JournalofFoodScienceandTechnology,2021,39(3):11-21.

基金项目： 河北省科技计划项目(18963002D-6)；核桃产业国家创新联盟(NAWI)资助项目；北京联合大学研究生科研创新后资助项目(YZ2020K001)。

透析袋规格是不是越小越好

还需要看你需要保留物质的分子量的，如果够大的话，可以用toscience提供的透析袋1kd

透析袋 材质

自ThomasGraham1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为哈灵生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

透析袋型号的意思解释图

透析过滤器的型号是，费森的，威高的

透析袋直径

透析袋有很多种，一般以分子量大小区分，有100，300，500，1000，2000---一直到35万，100万，有干燥的，一卷一卷的，不同的宽度，和长度，价格也不一样，具体使用方法是一样的，一般要用到专业透析夹，事半功倍。

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透析袋规格

  流

一、普通干型透析袋(美国联合碳化Viskase，甘油涂层，使用前需处理）

技术参数： 

△PH稳定范围 : 5-9

△污染物水平: 硫化物重金属

△化学兼容性: 与很多盐兼容，比如CaCl2, (NH4)2SO4；还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容，比如异丙醇、乙醇和丙酮。

△温度抵抗性：可煮沸，可高压灭菌。

△蛋白吸附： 每克透析袋吸附蛋白量小于1ng 

储存条件: 

透析袋可存放于10-29度；每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂。

透析袋使用前处理方法:

1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。

3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。

5. 冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。

6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。

7.实验要求不高的可以用简易处理方法：在沸水中煮10min即可使用。

截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写为MwCO）通常为1万左右，要根据各种透析袋的材料来定，29KD的，就是29000 道尔顿。

二、高精度、即用型透析袋（生物级，使用前无需处理，去除了硫化物和重金属离子，含0.05%叠氮钠防腐液)

生物技术透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物，无需预处理，只需用去离子水清洗即可使用，满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。

为满足不同实验室透析需求，有两种不同生物技术等级透析袋：纤维素透析袋和再生纤维素透析袋。

优点：

1.韧性膜材料，不易破损

2.杂质含量极少，可无需预处理，只需用去离子水清洗即可使用

3.孔径标准均一

4.对溶质的吸附性小

5.可选分子量范围广100-300000

6.特有生物技术膜，不含硫化物及金属杂质

四、透析袋应用：

去除盐类，表面活性剂和溶剂

样品溶液的缓冲液置换和PH值的调节

浓缩蛋白质，多肽和抗体

DNA电洗脱

电泳前稀释蛋白的制备

小分子污染物清除

结合研究

组织培养的提取纯化

五、透析袋的选择：

1.正确选择合适的截留分子量

截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。为达到合理有效的分离，需分离的两种物质分子量的比率至少为25.

选择截留分子量的经验法则：选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半，以获得至少90%的保留率。

2.正确选择扁平宽度

透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快；较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用，建议使用总长（包括闭合夹和顶部空间）为大约10-15厘米的透析袋

3.透析袋的化学相容性

化学相容性主要用作使用指导，不作为化学相容的保证。温度，浓度，长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。建议您自设条件进行测试。

六、透析袋的使用：

下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量，透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率，因此，一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。

1． 把适量的透析液（缓冲液）加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。（例如：在一升透析液中透析10毫升的样品）

2． 裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度（约占总样品体积量的20%）作为头部空间。

3． 把透析管插入打开的透析夹，在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋。

4． 由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度，夹紧透析夹。

5． 把透析样品放在合适的透析缓冲液中。

6． 透析要根据具体的应用需求。通常情况下，允许过夜透析。在持续透析的过程中，至少要进行3次全部更换透析液。建议在（透析后）2-4小时，6-8小时和10-14小时（第2天早晨）更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。

注：对于高浓度污染物，样品可能需要较长的时间透析，透析液需要更频繁的更换。

7． 透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃，再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。

七、透析袋的贮存和保质期：

在适当的储存情条件下，保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或4℃储存在聚乙烯袋中。未开封的透析袋4℃储存。一旦变湿，透析袋应浸泡在下列之一的溶液中：0.05%叠氮化钠，1%的苯甲酸钠或1%甲醛。（备注：一旦变潮湿，不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌）

八、透析袋的历史

    透析技术自Thomas Graham 于1861年发明到现在已有一百多年的历史，它已成为生物化学实验室最简便，最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，去除盐、少量有机溶剂、小分子杂质、样品浓缩和改变微量样品的缓冲系统等都要用到透析技术。 

    生物样品的透析只需使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子等物质不断扩散透析到袋外，直到袋内、外两边的浓度达到平衡。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

    透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的溶质浓度梯度形成的。透析的速度同欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度、膜的面积和温度成正比，与膜的厚度成反比。升高温度可加快透析速度。为最大限度地保持生物大分子的活性，通常采用4℃透析。 

    透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜。目前较常用的是美国Union Carbide （联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，其截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写为MwCO）通常从700到数万不等。 

    商品化的透析袋可制成管状，其扁平宽度为6～50 mm不等。为防干裂，出厂前一般都经10％的甘油处理，透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。新购进的透析袋必须经过处理才能使用。50％的乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，再用蒸馏水冲洗后即可使用。实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。使用后的透析袋洗净后可存于蒸馏水中，置4℃保存。若长时间不用，可加入适量的叠氮钠（NaN2），以抑制微生物的生长。干的透析袋弯折时易出现裂口，用时必须仔细检查。 

    经过处理的透析袋，使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满蒸馏水，用手指稍加压，检查是否漏液，确证无误后，再用蒸馏水洗净，方可装入待透析样品。装入样品时通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，因透析样品中的小分子浓度较大，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加是正常的，有时甚至可达50％以上。透析可以使用烧杯、量筒和塑料桶等容器，容器的大小以20-50:1为宜。少量样品溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。 

    通常为了把握透析效果，有时需要对透析液中欲去除的小分子残留物进行分析，如甘氨酸、二甲基甲酰胺、甲醛、戊二醛、碳酸根、偶联剂等。小分子残留物的检测分析方法很多，如 (NH4)2SO4可用1％的BaCl2检查，NaCl、KCl等可用1％的AgNO3 检查。有些检测方法比较复杂，或需要一定的条件，如确有必要可参考相关文献资料。 

    为了加快透析速度，提高透析效率，除及时更换透析液外，还可使用磁力搅拌，还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。美国生物医学公司（Biomed Instruments Inc.）生产的各种型号的Zeineh 透析器，由于使用对流透析的原理，使透析速度和效率大大提高。

附：透析袋的处理

 1. 根据需要，把透析管剪截成适当长度（10—20cm）。

 2. 在大体积的2%（w/v）碳酸氢纳和1mmol/L EDTA(pH8.0)中将透析管煮沸10分钟

 3. 用蒸馏水彻底清洗。

 4. 于EDTA(1mmol/L，pH8.0)中煮沸10分钟， 

 5. 或将透析管置盛有蒸馏水的烧杯内，高压蒸汽灭菌10分钟。

 6. 冷却后，存放于4℃。透析管必须确保始终浸于溶液中。

 7. 从此时起取用透析管时总须戴手套。

 8. 用前将透析管用蒸馏水清洗干净后即可使用。

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透析袋长度选择

3000或8000是指透析袋的分子截留量，3000是指分子量3000以上的从透析袋中保留，3000以下的可以扩散到透析袋外面的溶液中，8000是指分子量8000以上的从透析袋中保留，8000以下的可以扩散到透析袋外面的溶液中，杂蛋白的存在与透析的影响不大，主要考虑目的蛋白的分子量，要根据目的蛋白的分子量选择透析袋的型号

透析袋型号的意思解释

3000或8000是指透析袋的分子截留量，3000是指分子量3000以上的从透析袋中保留，3000以下的可以扩散到透析袋外面的溶液中，8000是指分子量8000以上的从透析袋中保留，8000以下的可以扩散到透析袋外面的溶液中，杂蛋白的存在与透析的影响不大，主要考虑目的蛋白的分子量，要根据目的蛋白的分子量选择透析袋的型号